Аналіз «живі/мертві» є дуже поширеною процедурою фарбування клітин. Живі клітини фарбуються кальцеїном і генерують зелену флуоресценцію при збудженні їх цитоплазми. Мертві клітини помічені гомодимерним барвником етідієм (EthD), який зв’язується з їхньою ДНК і флуоресціює червоним кольором.
Приготуйте 1/500 розведення фарби Live/Dead Aqua у PBS (без білка) з 1/20 розведення Fc блоку людини (тобто 2 мкл живого/мертвого + 50 мкл блоку Fc на 1000 мкл PBS). Додайте 200 мкл до зразків, перемішайте та інкубуйте 30 хвилин на льоду.
Набори LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain — це барвники для життєздатності, які можна фіксувати, які відрізняють живі клітини від мертвих на основі цілісності клітинної мембрани та доступу до доступних амінів. Потім клітини можна фіксувати для виявлення внутрішньоклітинного антигену без втрати вихідної моделі фарбування клітин.
Набори LIVE/DEAD для визначення життєздатності бактерій – це зручні та прості у використанні 2-кольорові флуоресцентні аналізи розрізняти популяції живих і мертвих бактеріальних клітин на основі цілісності мембрани. Ці набори містять зелену флуоресцентну фарбу SYTO 9 і червону флуоресцентну фарбу PI, які відрізняються своєю здатністю проникати в бактерії.
Фарбування живих/мертвих плям Hoechst Stain Він більш постійний, ніж DAPI і потребує меншої концентрації, щоб пройти через здорову клітинну мембрану. Протокол фарбування Hoechst вимагає лише однієї десятої кількості DAPI для фарбування живих клітин.